<ins id="5k0g5"><button id="5k0g5"></button></ins>
  • <ruby id="5k0g5"></ruby>

    1. <strong id="5k0g5"></strong>
    2. <acronym id="5k0g5"></acronym>
      <strong id="5k0g5"></strong>

    3. <samp id="5k0g5"><video id="5k0g5"></video></samp>
    4. 熱門搜索: 硫酸角質素(KS)ELISA試劑盒(種屬:魚) 白介素6(IL6)ELISA試劑盒(種屬:魚) 魚白介素10(IL10)ELISA試劑盒發貨及時 斑馬魚白介素12BELISA試劑盒發貨及時 兔載脂蛋白B(apo-B)ELISA試劑盒發貨及時 兔孕酮(PROG)ELISA試劑盒發貨及時 兔羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒發貨及時 兔抗酒石酸酸性磷酸酶ELISA試劑盒發貨及時 兔晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒發貨及時 兔結締組織生長因子ELISA試劑盒發貨及時 兔基質金屬蛋白酶9ELISA試劑盒發貨及時 兔肺表面活性物質相ELISA試劑盒發貨及時 CD206分子ELISA試劑盒(種屬:小鼠) CC趨化因子受體6ELISA試劑盒(種屬:小鼠) 阻抑素(PHB)ELISA試劑盒(種屬:大鼠) 中性內肽酶;腦啡ELISA試劑盒(種屬:大鼠)

      技術文章/ Technical Articles

      您的位置:首頁  /  技術文章  /  人胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒使用說明書

      人胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒使用說明書

      更新時間:2023-03-29      瀏覽次數:1440

      人胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒使用說明書

      實驗原理 

      本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗 (ELISA) 。往預先包被有人胰島素(INS) 捕獲抗體的微孔中, 依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測抗體,HRP 酶結合物,中間經過溫育和洗滌,用底物 TMB 顯色,TMB 在過氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素  (INS) 呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度 (OD ) ,計算樣品濃度。

      操作步驟 

      1.  從室溫平衡 10 分鐘后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2.  加樣:分別將樣品或不同濃度標準品按照 100 μ l 每孔加入相應孔中,空白孔加入 100μL 通用稀釋液。蓋 上封板膜后 37℃溫育 1 小時。  (建議:將待測樣本用通用稀釋液稀釋 1 倍后再加入酶標板內測試。 減少基質效應對測試結果的誤差影響,最后計算樣本濃度時需乘以對應的稀釋倍數。所有的待測樣本和 準品在檢測中建議設立復孔) 。

      3.  加生物素化抗體:取出酶標板,棄去液體,不用洗滌。每孔直接加入生物素化抗體工作液 100 μL,蓋上  37℃溫育 1 小時。

      4.  洗板:棄去液體,每孔加入 300 μL 1x 洗滌液,靜置 1 分鐘,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板

      3 次 (也可用洗板機洗板) 。

      5.  加酶結合物工液:每孔加入酶結合物工作液 100 μL,蓋上封板膜后 37℃溫育 30 分鐘。

      6.  洗板:棄去液體按步驟 4 洗滌方法,洗板 5 次。

      7.  加底物:每加入底物(TMB)90 μL,蓋上封板膜,37℃避光溫育 15 分鐘。

      8.  加終止液:取出酶標板,每孔直接加入終止液 50 μL,立即在 450nm 波長處測定各孔的OD 。



      結果判斷:

      1.  計算標品和樣本復孔的平均 OD 值并減去空白孔的OD 值作為校正值。以濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標, 雙對數坐標紙上繪出四參數邏輯函數的標準曲線(作圖時去掉空白組的值)。

      2.  若樣品OD 值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測并在計算樣本濃度時乘以相應的稀釋倍數。

      型數據和參考曲線:

      以下據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。

      image.png

       

       

       (ng/mL)

      10

      5

      2.5

      1.25

      0.625

      0.312

      0. 156

      0

      OD 

      2.22

      1.56

      0.92

      0.63

      0.42

      0.25

      0. 18

      0.08

      OD 

      2. 14

      1.48

      0.94

      0.55

      0.34

      0. 17

      0.1

       

      -





      盒性能 

      1.  重復性:板內變異系數小于 10%,板間變異系數小于 10%。

      2.  回收率:在選取的健康人血清、血漿和組織勻漿中加入 3 個不同濃度水平的人 INS,計算回收率

       

      本類型

      均回收率

       (n=8)

      84- 101

      96

      漿(n=8)

      92- 105

      102

      細胞培養上清(n=8)

      96- 108

      105

       

       

      3.  線性稀釋:分別在選取的 4 份健康人血清、血漿和組織勻漿中加入高濃度人 INS,在標準曲線動力學范圍

      進行稀釋,評估線性。評估線性。

      本試劑只能用于科學研究,不得用于醫學診斷          6


       

       

      稀釋比

      收率  (%)

      漿

        培養

      1 2

       (%)

      84-95

      88-96

      90- 110

      均回收率  (%)

      91

      93

      96

      1 4

       (%)

      89- 103

      87- 108

      105- 115

      均回收率  (%)

      94

      98

      108

      注意事項

      1.  嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃ 。使用

      后立即冷藏保存試劑。

      2.  洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

      3.  消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD 值。

      4.  底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

      5.  避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

      6.  在儲存和溫育時避免強光直接照射。

      7.  平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

      8.  任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑

      的生物活性。

      9.  不能使用過期產品。

      10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。


      微信掃一掃

      郵箱:2450868877@qq.com

      傳真:86-區號-傳真號碼

      地址:上海市楊浦區鐵嶺路32號1519-10室

      Copyright © 2025 上海仁捷生物科技有限公司版權所有   備案號:滬ICP備16052159號-1   總訪問量:319785   技術支持:化工儀器網

      TEL:17302193538

      掃碼加微信
      91老司机精品福利在线_人妻夜夜爽一区_国产在线观看网址你懂得_久久精品日日躁夜夜躁
      <ins id="5k0g5"><button id="5k0g5"></button></ins>
    5. <ruby id="5k0g5"></ruby>

      1. <strong id="5k0g5"></strong>
      2. <acronym id="5k0g5"></acronym>
        <strong id="5k0g5"></strong>

      3. <samp id="5k0g5"><video id="5k0g5"></video></samp>