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      上海仁捷生物教你ELISA檢測試劑盒常見問題處理

      更新時間:2017-08-03      瀏覽次數:1640

      ELISA檢測試劑盒常見問題處理
       
      出現問題出現問題的原因解決辦法
      曲線
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
       
      OD值不正常
       
       
       
       
       
       
       
      試劑盒未回溫試劑盒回溫到25℃
      溫度控制不好控制正確溫度
      孵育時間不準確控制孵育時間
      洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干
      陽光直射,對著風直接吹避風避光
      酶標儀的波長錯誤酶標儀的波長450nm
      抗體的稀釋錯誤正確的稀釋抗體
      水質問題用娃哈哈礦泉水代替
       
      白   板
       
       
      洗滌液配制錯誤正確的配制洗滌液
      少加液體(抗體、酶標記物、A液、B液)正確的步驟加液體
      錯加液體 
       
      無 梯 度
       
       
      標準品也污染換標準品點板
      OD值不正常控制溫度時間在做一次
      人為點板/
      線 性 不 好
       
      OD值不正常控制溫度時間在做一次
      人為點板/
      回  收  率
       
       
       
       
       
       
       
      空白管陽性高
       
       
      樣本本身就是陽性樣本換陰性樣本做回收率
      空白管在實驗中被污染實驗中防止交叉污染
      水質原因用娃哈哈礦泉水代替
       
       
      偏  高
       
       
       
       
      添加量不準確的添加量
      添加濃度不適合添加合適的濃度
      取液吹干量多準確的取液吹干
      取到其它相層液體取需用相吹干
      復溶液未稀釋或加入量少正確的稀釋復溶液
       
      偏  低
       
       
       
      添加量不準確的添加量
      添加濃度不適合添加合適的濃度
      取液吹干量少準確的取液吹干
      復溶液稀釋錯誤或加入量多正確的稀釋復溶液
       
       
      假陰、陽性
       
       
       
       
       
      水質原因點復溶液驗證用娃哈哈礦泉水代替
      實驗操作原因
       
       
       
      吸取到其它相吹干準確的取液吹干
      離心不*延長離心時間
      樣本的污染更換樣本
      乳化未處理*溫?。?0℃)處理乳化現象
      儀器試劑原因
       
      離心管未清洗干凈正確的洗滌器具
      有機溶劑的影響做試劑空白看影響結果
      衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質)更換衍生化試劑
      與曲線好壞相關保證曲線的正常
       
       
      金標檢測(T)線顏色較淺
       
       
      尿液pH偏堿性用0.01M HCl調節尿液pH值到7.0左右。
      尿樣滴加過多重新測定,尿樣按照說明書,控制在2滴
      尿液過于混濁將尿液離心后,取上清液重新測定
       
       
      金標質控(C)線不出現
       
       
       
       
       
       
      檢測卡由于高溫、受潮等原因失效尿樣需要重新檢測。
      過了有效期失效。該批號的金標應丟棄處理,尿液需要重新檢測
       
      操作過程中檢測卡沒有平放,導致液體樣品直接沖過檢測區尿樣需要重新檢測,且檢測卡平放于桌面上再加樣。
      尿液樣品中含有較高的抑制或者干擾抗原抗體反應的物質(比如明礬、小蘇打、氧化劑、肌酐等)該尿液的檢測結果無效
      金標卡上在除了T和C線之外的其他地方出線金標卡上的劃痕;膠體金在跑板過程中沒有*跑干凈而在卡上的痕跡;該檢測卡結果不可信,尿液需要重新檢測。
      實驗重復性不好操作人員的不一致,取樣的不一致,樣本數量的多少,加樣時間的長短,洗滌條件不一致,加樣量不一致盡量保持的實驗一致性
       
      分析軟件的使用
       
      不能設置和保存正確的設置和保存
      如何判斷曲線的好壞和分析結果正確的判斷曲線的好壞和分析結果
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